人源細胞系常規(guī)培養(yǎng)傳代流程：

　?。?）吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?-2min）

　　（2）注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存

　?。?）取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

　?。?）鏡下觀察消化情況，在HS505.T人淋巴結(jié)成纖維樣細胞生長特性邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?，加6-8ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。

　　人源細胞系的培養(yǎng)注意事項：

　　1．傳代培養(yǎng)時要注意無菌操作并防止細胞之間的交叉污染，所有操作要盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每一種細胞使用一套器材，培養(yǎng)用液應(yīng)嚴(yán)格分開。

　　2．每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代。

　　3．如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BSS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗菌素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基等。

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