利用NanoDropOne測量菌液的OD600值，是一個常規(guī)且成熟的功能。這大大擴展了這臺儀器的使用場景，使其能從分子層面的定量，延伸到對生命體狀態(tài)的宏觀監(jiān)測。

一、核心解答：一臺儀器，兩種方式

    NanoDropOne可以測量OD600。事實上，無論是應(yīng)用列表，還是全球眾多實驗室的日常使用，都將其視為一個標準功能。

    這臺儀器提供了兩種測量OD600的方式，你可以根據(jù)手頭的樣品量和習(xí)慣來選擇：

    微基座模式(PedestalMethod)：這是NanoDrop的特色功能。只需2微升菌液，直接滴在檢測基座上，數(shù)秒內(nèi)即可出結(jié)果。它的優(yōu)勢在于樣品用量少、無需比色皿、速度快。

    比色皿模式(CuvetteMethod)：這個功能僅適用于NanoDropOneC型號。它像傳統(tǒng)分光光度計一樣，使用1厘米光程的比色皿進行測量。

二、如何操作：以微基座模式為例

    整個過程還是熟悉的“點樣、測量、擦拭"三步曲，非常簡單：

    開機與選擇：開機后，在觸摸屏主界面上找到并點擊“OD600"圖標，進入測量模式。

    清潔基座：用無塵紙蘸取少量去離子水，清潔上下基座的光纖表面，確保沒有上次測量的殘留。

    建立空白對照：吸取2微升用于培養(yǎng)細菌的空白培養(yǎng)基（如無菌LB液體培養(yǎng)基），加到下基座上，放下檢測臂，點擊“Blank"（空白）。

    上樣測量：抬起檢測臂，用干凈的無塵紙擦干上下基座。將待測的細菌培養(yǎng)液輕輕混勻，吸取2微升加到基座上，放下檢測臂，點擊“Measure"（測量）。

    讀取結(jié)果：儀器會顯示吸光度（OD600）和根據(jù)系數(shù)計算出的細胞濃度（cells/mL）。如果未輸入系數(shù)，則只顯示OD600值。

    清潔收尾：測量完成后，抬起檢測臂，用無塵紙清潔基座，為下一個樣品或關(guān)機做準備。

三、結(jié)果解讀：如何看懂OD600數(shù)值

    屏幕上會直接顯示測量結(jié)果，主要有兩項：

    OD600：測得的吸光度值。

    CellConcentration：如果設(shè)定了細胞數(shù)量轉(zhuǎn)換系數(shù)，儀器會利用公式c=A*factor(其中c為細胞濃度,A為600nm處的吸光度,factor為轉(zhuǎn)換系數(shù))自動計算出細胞濃度(cells/mL)。儀器默認系數(shù)為1x10?，但建議根據(jù)具體實驗體系進行校準。

    幾點注意

    線性范圍：NanoDropOne的比色皿模式，準確讀數(shù)通常在0.04到1.5A之間。為了保證數(shù)據(jù)可靠，當(dāng)測量值較高時，建議將菌液用新鮮培養(yǎng)基進行梯度稀釋后再測。

    默認系數(shù)：儀器默認的細胞轉(zhuǎn)換系數(shù)是1.00e+008(即1x10?)。這只是一個通用估算值，不同菌株、不同培養(yǎng)基都可能使真實的細胞數(shù)量與OD值的關(guān)系發(fā)生改變。

    混勻是關(guān)鍵：取樣前務(wù)必將菌液輕柔、混勻，避免細菌沉降導(dǎo)致測量誤差。

    排除干擾：如果培養(yǎng)基顏色較深，或者含有其他在600nm有吸收的物質(zhì)，可能會造成干擾。

總結(jié)

    總而言之，NanoDropOne可以測OD600，這是其眾多預(yù)設(shè)應(yīng)用中的一項。其核心價值在于，將原先需要大體積比色皿的宏觀測量，縮減為僅需2微升的微量操作，實現(xiàn)了核酸蛋白定量與細胞培養(yǎng)監(jiān)測在同一平臺上的無縫銜接。

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