賽默飛Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀

    在蛋白質(zhì)組學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)及生物制藥研發(fā)中，總蛋白濃度的準(zhǔn)確定量是Westernblot、質(zhì)譜分析及酶活性測定等下游實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵前提。傳統(tǒng)比色法（如Bradford和BCA）雖應(yīng)用廣泛，卻容易受去垢劑、還原試劑及緩沖液組分的干擾，導(dǎo)致結(jié)果偏差。Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀作為Invitrogen™第四代臺(tái)式熒光計(jì)，采用熒光染料特異性結(jié)合技術(shù)，可在復(fù)雜緩沖液環(huán)境中實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)的高選擇性定量。其12.5μg/mL的檢測下限與寬達(dá)5個(gè)數(shù)量級的動(dòng)態(tài)范圍，使其在處理珍貴微量樣本和復(fù)雜裂解液時(shí)尤為可靠。

    選擇Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀，意味著為您的蛋白質(zhì)分析工作選擇了一份高特異性、快速準(zhǔn)確的熒光定量方案。

一、產(chǎn)品核心優(yōu)勢解析

    Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀的設(shè)計(jì)聚焦于蛋白質(zhì)定量中的兩大核心挑戰(zhàn)：如何在復(fù)雜緩沖液環(huán)境中獲得準(zhǔn)確濃度，以及如何用微量珍貴樣本完成檢測。

    高特異性熒光檢測原理

    該儀器采用專門研制的熒光染料，這些染料只有在與蛋白質(zhì)結(jié)合時(shí)方可發(fā)射熒光信號。與傳統(tǒng)紫外分光光度法測量280nm所有吸光物質(zhì)不同，Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀通過特異性熒光染料區(qū)分目標(biāo)蛋白與雜質(zhì)，即使有還原試劑、鹽、游離核苷酸、氨基酸或DNA等常見污染物共存，仍能提供準(zhǔn)確結(jié)果。

    與BCA和Bradford等傳統(tǒng)比色法相比，熒光法具有更寬的動(dòng)態(tài)范圍和更高的準(zhǔn)確度，熒光蛋白檢測試劑盒對蛋白質(zhì)具有高選擇性，并且在存在還原試劑的情況下也能保持高精度。

    微量樣本兼容性與檢測靈敏度

    Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀僅需1μL樣品即可完成檢測，對于濃度低至12.5μg/mL的蛋白質(zhì)樣本仍能進(jìn)行準(zhǔn)確定量。這一特性使其特別適合處理從稀有樣本中提取的蛋白質(zhì)、細(xì)胞裂解液中的低豐度靶標(biāo)以及純化后的微量蛋白樣品。

    儀器搭載雙核處理器，檢測速度約每個(gè)樣本3秒，預(yù)熱時(shí)間少于35秒，顯著提升了樣品質(zhì)控環(huán)節(jié)的工作效率。

    寬動(dòng)態(tài)范圍，覆蓋多樣化濃度需求

    Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀提供兩種互補(bǔ)的檢測試劑盒，覆蓋12.5μg/mL至20mg/mL的完整濃度范圍。Qubit蛋白檢測試劑盒可精準(zhǔn)定量12.5μg/mL至5mg/mL范圍內(nèi)的樣品；Qubit蛋白寬范圍（BR）檢測試劑盒則將定量范圍擴(kuò)展至0.1mg/mL至20mg/mL，使大多數(shù)樣品能夠以純品（未稀釋）形式直接檢測，免除了傳統(tǒng)蛋白定量測定方法所需的推算和稀釋步驟。

    兩種檢測試劑盒的選擇指南

    Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀配套兩種獨(dú)特的蛋白定量試劑盒，用戶可根據(jù)樣品濃度和污染物類型靈活選擇。

    對比維度Qubit蛋白檢測試劑盒Qubit蛋白BR檢測試劑盒

    貨號Q33211（100次）/Q33212（500次）A50668（100次）/A50669（500次）

    定量范圍12.5μg/mL至5mg/mL0.1至20mg/mL

    樣品體積1-20μL10或20μL

    孵育時(shí)間15分鐘（室溫）10分鐘（室溫）

    耐受污染物還原試劑（DTT、β-巰基乙醇）、鹽、游離核苷酸、氨基酸、溶劑、DNA去垢劑、還原試劑（DTT、β-巰基乙醇）、鹽、核酸

    檢測選擇性對蛋白質(zhì)高度選擇性對蛋白質(zhì)高度選擇性

    檢測平臺(tái)Qubit4、Flex等Qubit系列熒光計(jì)僅限Qubit4熒光計(jì)

    蛋白間差異低蛋白間變異（8.7%，堿性組蛋白除外）低蛋白間變異

    Qubit蛋白BR檢測試劑盒的關(guān)鍵優(yōu)勢在于其寬動(dòng)態(tài)范圍和兩點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線設(shè)計(jì)：用戶只需使用兩點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)，無需耗時(shí)制備多條標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可直接獲得蛋白濃度，免除了離線計(jì)算步驟。該檢測可兼容多種常見污染物，包括去垢劑、還原試劑（如DTT、β-巰基乙醇）、鹽和核酸，使其特別適用于細(xì)胞裂解液、血清、血漿或復(fù)雜蛋白混合物的定量。

    快速簡便的操作流程

    Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀的操作極為簡便，大幅減少了蛋白質(zhì)定量實(shí)驗(yàn)的時(shí)間成本。

    檢測步驟

    開機(jī)預(yù)熱，預(yù)熱時(shí)間少于35秒

    根據(jù)樣品濃度選擇合適的檢測試劑盒（蛋白檢測或蛋白BR檢測）

    按說明書比例混合染料與緩沖液，制備工作溶液

    將1-20μL樣品加入工作溶液中，混勻

    室溫孵育（蛋白檢測約15分鐘，蛋白BR檢測約10分鐘）

    將檢測管插入儀器，觸摸屏選擇對應(yīng)檢測程序

    先檢測兩點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品（S1和S2），儀器自動(dòng)生成校準(zhǔn)曲線

    檢測樣品，3秒內(nèi)顯示濃度結(jié)果

    數(shù)據(jù)導(dǎo)出與存儲(chǔ)

    Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀最多可存儲(chǔ)1000個(gè)樣品結(jié)果，數(shù)據(jù)可通過USB驅(qū)動(dòng)器、USB連接線或WiFi無線傳輸至ThermoFisherConnect云平臺(tái)，便于長期管理和團(tuán)隊(duì)分享。5.7英寸彩色觸摸屏支持包括簡體中文在內(nèi)的7種語言界面，操作直觀便捷。

二、與傳統(tǒng)蛋白定量方法的性能對比

    Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀與傳統(tǒng)比色法在多個(gè)維度上存在顯著差異：

    對比維度Qubit4.0熒光法Bradford/BCA比色法

    檢測原理熒光染料特異性結(jié)合蛋白基于顯色反應(yīng)的比色測定

    污染物影響耐受還原試劑、鹽、核酸、部分去垢劑（BR檢測）易受去垢劑、還原試劑干擾

    動(dòng)態(tài)范圍寬，12.5μg/mL至20mg/mL相對較窄

    靈敏度低至12.5μg/mL，可檢測低豐度樣本靈敏度有限，低濃度樣本偏差大

    檢測速度每個(gè)樣本<3秒反應(yīng)時(shí)間長，需溫育

    樣品體積1-20μL通常需要更大體積

    標(biāo)準(zhǔn)曲線兩點(diǎn)校準(zhǔn)，無需每次繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線需要多條標(biāo)準(zhǔn)品制備標(biāo)準(zhǔn)曲線

    蛋白間變異低（8.7%）較高，不同蛋白間差異大

    Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀相比Bradford等傳統(tǒng)檢測方法提供了更寬的動(dòng)態(tài)范圍和更高的準(zhǔn)確度。研究表明，使用Qubit蛋白檢測試劑盒測得的蛋白質(zhì)間變異可低至8.7%（排除堿性組蛋白后），顯著優(yōu)于傳統(tǒng)比色法，這一特性對于確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性和可比性具有重要意義。

    滿足多元化的蛋白質(zhì)定量需求

    Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀已在多項(xiàng)蛋白質(zhì)研究應(yīng)用中驗(yàn)證了其可靠性能。

    細(xì)胞裂解液定量

    在進(jìn)行Westernblot分析時(shí)，準(zhǔn)確的蛋白上樣量是獲得可比性結(jié)果的前提。Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀可精準(zhǔn)測定細(xì)胞裂解液的總蛋白濃度，確保電泳前各泳道蛋白負(fù)荷一致。研究數(shù)據(jù)表明，使用Qubit蛋白BR檢測測定的裂解物蛋白濃度，在后續(xù)Westernblot中展現(xiàn)出更一致的目標(biāo)信號強(qiáng)度。

    純化蛋白與抗體定量

    對于重組蛋白純化、抗體生產(chǎn)及酶制劑的濃度測定，Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀可提供快速、準(zhǔn)確的定量結(jié)果。其寬動(dòng)態(tài)范圍覆蓋了從低濃度純化產(chǎn)物到高濃度原液的全濃度區(qū)間，無需稀釋即可直接檢測。

    表達(dá)滴度快速估算

    在蛋白質(zhì)表達(dá)條件優(yōu)化和粗提物表達(dá)水平篩查中，Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀可提供快速的總蛋白定量，幫助研究人員快速評估不同構(gòu)建體或培養(yǎng)條件下的表達(dá)水平。

    復(fù)雜樣品類型兼容

    該檢測適用于多種蛋白質(zhì)樣品類型，包括純化蛋白、細(xì)胞裂解液、組織提取物、血清、血漿及復(fù)雜蛋白混合物。Qubit蛋白BR檢測試劑盒可兼容去垢劑和還原試劑等常見污染物，使其特別適合處理天然來源的復(fù)雜樣品。

    與NanoDrop的功能互補(bǔ)關(guān)系

    Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀與NanoDrop紫外分光光度計(jì)是功能互補(bǔ)而非相互替代的工具，兩者在實(shí)驗(yàn)室定量工作中各有所長。

    決策維度推薦選擇核心考量

    檢測目的準(zhǔn)確定量蛋白濃度→Qubit4.0；快速篩查純度→NanoDropQubit提供特異性定量，NanoDrop提供純度信息

    樣品珍貴度微量珍貴樣本→Qubit4.0；樣品充足→兩者皆可Qubit僅需1μL樣品

    濃度要求低濃度/低豐度樣本→Qubit4.0；高濃度樣本→兩者皆可Qubit靈敏度優(yōu)勢在低濃度區(qū)尤為突出

    污染物情況復(fù)雜緩沖液/還原試劑存在→Qubit4.0熒光法耐受性優(yōu)于比色法

    檢測通量少量關(guān)鍵樣本精確定量→Qubit4.0；大量樣本初步篩查→NanoDropQubit專注于關(guān)鍵步驟的精準(zhǔn)定量

    建議的工作流程：許多實(shí)驗(yàn)室采用Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀與NanoDrop配合使用的策略——先用NanoDrop快速評估樣品中是否存在污染物，獲取大致濃度范圍和純度信息（A280、A260/A280比值）；再對需要用于關(guān)鍵下游實(shí)驗(yàn)的樣本用Qubit進(jìn)行精確定量。這種組合策略既利用了紫外分光法快速檢測雜質(zhì)的能力，又發(fā)揮了熒光法的特異性和靈敏度優(yōu)勢。

三、主要技術(shù)參數(shù)一覽

    Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀的主要技術(shù)參數(shù)如下：

    參數(shù)類別具體規(guī)格

    檢測原理熒光染料特異性結(jié)合定量

    檢測靶標(biāo)蛋白質(zhì)（另支持DNA、RNA）

    動(dòng)態(tài)范圍5個(gè)數(shù)量級

    樣品體積1-20μL

    檢測時(shí)間<3秒/樣本

    預(yù)熱時(shí)間<35秒

    檢測限（蛋白）12.5μg/mL

    光源藍(lán)色LED（峰值~470nm），紅色LED（峰值~635nm）

    檢測器光電二極管（測量范圍300-1000nm）

    數(shù)據(jù)存儲(chǔ)最多1000個(gè)樣品結(jié)果

    顯示屏5.7英寸彩色觸摸屏

    數(shù)據(jù)導(dǎo)出USB驅(qū)動(dòng)器、USB數(shù)據(jù)線、WiFi

    支持語言英語、簡體中文等7種語言

    外形尺寸13.6×25×5.5cm

    重量743g

    工作溫度10-40°C

    工作濕度20-80%（無冷凝）

    電源100-240VAC，50/60Hz

四、選型參考與采購建議

    在選擇Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀時(shí)，可參考以下因素：

    樣品類型：純化蛋白、抗體、細(xì)胞裂解液、血清/血漿、組織提取物等

    濃度范圍：常規(guī)濃度（12.5μg/mL-5mg/mL）選蛋白檢測試劑盒Q33211/Q33212；高濃度或需免稀釋檢測選蛋白BR檢測試劑盒A50668/A50669

    污染物情況：含還原試劑選蛋白檢測試劑盒；含去垢劑或復(fù)雜緩沖液選蛋白BR檢測試劑盒

    使用頻率：常規(guī)用量選擇100次檢測規(guī)格；高通量實(shí)驗(yàn)室選擇500次檢測規(guī)格

    預(yù)算參考：Qubit4.0熒光定量儀主機(jī)市場參考價(jià)在2.0萬-4.2萬元之間，蛋白檢測試劑盒Q33211（100次）約1，468-1,561元，Q33212（500次）約4,436元，具體價(jià)格根據(jù)配置和采購渠道有所差異

總結(jié)

    綜上所述，賽默飛Qubit4.0蛋白質(zhì)定量檢測儀憑借其高特異性熒光檢測原理、微量樣本兼容性以及兩種互補(bǔ)的試劑盒配置，成為蛋白質(zhì)定量的可靠選擇。無論是Westernblot前的裂解液定量、純化蛋白的濃度測定，還是復(fù)雜生物樣品的總蛋白分析，這款設(shè)備都能提供快速、準(zhǔn)確且高重復(fù)性的檢測支持。根據(jù)您的樣品類型和濃度范圍選擇合適的試劑盒，并遵循規(guī)范的操作流程，將有助于提升蛋白質(zhì)分析工作的效率與數(shù)據(jù)可靠性。