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技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2020-33
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是離體方法中主要的一種，是從動(dòng)物體內(nèi)取出細(xì)胞，模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，在無菌、適溫、豐富的營(yíng)養(yǎng)條件下，使離體細(xì)胞生存、生長(zhǎng)并維持結(jié)構(gòu)和功能的一門技術(shù)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)是科學(xué)探究的基礎(chǔ)，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)服務(wù)可以提供包括細(xì)胞侵襲檢測(cè)、細(xì)胞劃痕檢測(cè)以及細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)等的研究。細(xì)胞體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)對(duì)于科學(xué)研究至關(guān)重要，然而在細(xì)胞培養(yǎng)中，常會(huì)因?yàn)椴贿m宜的環(huán)境條件以及不得當(dāng)?shù)牟僮鲗?dǎo)致細(xì)胞被污染。在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中如何避免污染是一項(xiàng)很重要的工作，現(xiàn)在我們來看一下細(xì)胞體外培養(yǎng)中常見的污染種類，以及避免方法。...
查看更多2020-220
關(guān)于細(xì)胞不貼壁的原因：1、胰蛋白酶消化過度。2、支原體污染。3、培養(yǎng)基pH值過堿（NaHCO3分解）。4、細(xì)胞老化。5、接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。關(guān)于細(xì)胞不貼壁的解決方法：1、縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度。2、分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。3、使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無菌CO2。4、啟用新的保種細(xì)胞。5、調(diào)節(jié)好接種細(xì)胞濃度。
查看更多2020-219
南美胎牛血清使用方法：在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)常加入5%-20%的Gibco胎牛血清，常使用的胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中使用10%的胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞，效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清，要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的胎牛血清濃度。南美胎牛血清作用：1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別...
查看更多2020-217
1、收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。2、瓶中運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用，請(qǐng)換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。3、對(duì)于貼壁細(xì)胞，若大部分細(xì)胞漂浮，置于培養(yǎng)箱隔夜觀察，大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁，表明細(xì)胞活力正常，繼續(xù)培養(yǎng)，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉；若大部分細(xì)胞仍然不貼壁，將漂浮的細(xì)胞離心收集，用臺(tái)盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力，并與本公司銷售人員及時(shí)聯(lián)系。4、建議客戶收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請(qǐng)于一周內(nèi)與本公...
查看更多2020-213
人黑色素瘤貼壁細(xì)胞培養(yǎng)方法如下：1、從手術(shù)室無菌取腦髓灰質(zhì)或白質(zhì)后，仔細(xì)剝除腦膜、血管和纖維成分，置Hanks液中漂洗一、二次。2、置于30—50倍體積的Hanks液中，此時(shí)腦組織比較柔軟，反復(fù)吹打即制成細(xì)胞懸液。3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后，細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)快自然下沉，脂肪等雜物易漂浮，可吸除上層、反復(fù)二、三次，即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細(xì)胞成分。4、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液，通過紗網(wǎng)成紗布過濾，計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞密度。5、接入培養(yǎng)瓶或皿中，置5%CO2溫箱...
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