技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2020-210
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:1.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:①準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K:GIBCO,貨號(hào):21127-022);北美胎牛血清,10%;PS1%。②培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。③凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。2.細(xì)胞處理:①?gòu)?fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)基...
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2020-26
Hyclone培養(yǎng)基是通過(guò)代謝途徑設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)的調(diào)節(jié)友好的培養(yǎng)基,以增加制備抗體和抗體片段的工藝產(chǎn)量,用于多種工程雜交瘤和重組骨髓瘤細(xì)胞系中的治療用途。培養(yǎng)基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時(shí)又分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于細(xì)胞停泊于一個(gè)位置生長(zhǎng),適于生長(zhǎng)較快、附著較困難腫瘤細(xì)胞等。Hyclone培養(yǎng)基特色:1.FBS和其它血清多樣化的血清產(chǎn)品,包括胎牛血清(F...
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2020-119
牛胚氣管細(xì)胞培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。細(xì)胞處理:1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在...
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2020-116
1、收到人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞后首先觀(guān)察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。2、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。3、用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀(guān)察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染...
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2020-115
活性炭胎牛血清質(zhì)量非常好,用途比較廣,適用于各種癌細(xì)胞株,嬌貴細(xì)胞,原代細(xì)胞,干細(xì)胞(胚胎干細(xì)胞,間充質(zhì)干細(xì)胞等)培養(yǎng)。注意事項(xiàng):有少量蛋白質(zhì)結(jié)塊析出不影響使用。未融化或融化未經(jīng)搖勻的血清禁止直接放入高溫水浴內(nèi)加溫。減少血清重復(fù)凍融。血清在室溫或4℃冰箱內(nèi)放置過(guò)久會(huì)影響促細(xì)胞生長(zhǎng)效果。活性炭胎牛血清采自新西蘭源健康母牛的出生前胎牛,經(jīng)無(wú)菌采集、批量混合,經(jīng)過(guò)3次0.1um過(guò)濾分裝。在此基礎(chǔ)上,經(jīng)過(guò)活性炭和葡聚糖處理,以降低血清中多種激素和生長(zhǎng)因子水平?;钚蕴?葡聚糖FBS已經(jīng)...
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