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技術(shù)文章
2019-830
細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染1.細(xì)胞培養(yǎng)(HEK293T)1)顯微鏡下觀察細(xì)胞，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，去上清；2)加入預(yù)熱的PBS3ml,溫柔地清洗細(xì)胞,棄去PBS；3)用胰蛋白酶消化細(xì)胞，通常75cm2培養(yǎng)瓶的貼壁細(xì)胞用3ml胰蛋白酶于37oC處理5min；4)待細(xì)胞脫落后，加入5mlDMEM培養(yǎng)液(含10%FBS)以終止消化反應(yīng)，并將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移入15ml或50ml離心管中；5)1000rpm離心5min，去除上清；6)加入10mlDMEM培養(yǎng)液(含10%FBS)，重新懸浮細(xì)胞，使細(xì)胞充分...
查看更多2019-829
（一）無菌操作前的準(zhǔn)備工作培養(yǎng)材料接種時(shí)的無菌操作過程除上述各項(xiàng)操作外，還需完成以下無菌操作步驟，從而獲得接種的無菌培養(yǎng)材料。工作人員無菌操作前需用肥皂刷洗雙手及手臂，并用流水沖凈，并對(duì)手臂**后穿戴好**工作服、工作帽和口罩，更換拖鞋，才能進(jìn)入無菌操作區(qū)。如進(jìn)入層流操作室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，應(yīng)完成緩沖準(zhǔn)備區(qū)內(nèi)的淋浴、一次更換**衣帽、拖鞋；手臂**、二次更換**防護(hù)衣帽、手套、拖鞋等；再在風(fēng)淋區(qū)進(jìn)行無菌風(fēng)淋后方可進(jìn)入層流操作室。進(jìn)入無菌操作區(qū)后，再用70%～75%的酒精擦拭雙手和...
查看更多2019-828
培養(yǎng)基滅菌是否*，直接影響科研檢測(cè)數(shù)據(jù)，影響培養(yǎng)基滅菌的因素很多，除了培養(yǎng)基內(nèi)雜菌的種類和數(shù)量，滅菌時(shí)間長(zhǎng)短和溫度高低，還取決于以下幾點(diǎn)營(yíng)養(yǎng)成分的保持濕熱滅菌時(shí)，微生物被殺死的同時(shí)，培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞，特別是氨基酸和維生素。如在121℃，僅20min，就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞，蛋氨酸和色氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營(yíng)養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng)，造成培養(yǎng)基中原有營(yíng)養(yǎng)成分的數(shù)量變化，因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量。微生物的耐熱性細(xì)...
查看更多2019-827
近來，國(guó)家的干細(xì)胞的政策是一個(gè)接一個(gè)。對(duì)應(yīng)的，來自用戶的咨詢也是一個(gè)接一個(gè)。大多數(shù)的問題是：現(xiàn)在都在說無血清培養(yǎng)基，無血清培養(yǎng)基和血清培養(yǎng)基到底有什么差別？差別很大，從用途方面簡(jiǎn)單說下你感受的可能更具體。如果你是提供間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）藥物的，差別在于：1.你拿到產(chǎn)品注冊(cè)證的可能性更大、需要提供的資料更少、花的時(shí)間更少。2.你的干細(xì)胞產(chǎn)品更安全。3.你的干細(xì)胞產(chǎn)品性能更*。4.你的干細(xì)胞產(chǎn)品質(zhì)量更穩(wěn)定。5.你的細(xì)胞產(chǎn)品干性更好。如果你是做間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）存儲(chǔ)與應(yīng)用的，...
查看更多2019-823
1、胎牛血清的選擇市場(chǎng)上的胎牛血清種類繁多，魚龍混雜，很多科研工作者，特別是剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人，難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣。根據(jù)鄙人十多年來血清生產(chǎn)銷售的經(jīng)驗(yàn)來看一、外觀拿到血清，zui先接觸的是血清外觀，對(duì)于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來說，外觀的判斷尤為重要1、顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl，實(shí)際上，血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無直接影響，這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶血...
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