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技術(shù)文章
2019-823
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對(duì)細(xì)胞不貼壁、生長緩慢、生長不好，甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因：●胰蛋白酶消化過度●支原體污染●培養(yǎng)基pH值過堿（NaHCO3分解）●細(xì)胞老化●接種細(xì)胞起始濃度太低或太高解決方法：●縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度●分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物?！袷褂脽o菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無菌CO2●啟用新的保種...
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4．特異性紅細(xì)胞形態(tài)改變：（1）刺（棘）狀細(xì)胞或鋸形細(xì)胞（AcaNtbocyte，BurrCells）：在血細(xì)胞表面呈不規(guī)則的、較多的刺狀突出，呈鋸齒狀或刺狀。加EDTA-Na2更顯著。此細(xì)胞由膜質(zhì)改變所致；見于吸收不良反應(yīng)、肝病、脾切除后、PK缺乏性貧血、先天性缺乏β-脂蛋白血癥。（2）刺毛細(xì)胞（Echinocyte）：整個(gè)細(xì)胞表面有棘突狀突起，從皺縐圓盤形發(fā)展或皺縮球形，直至棘突消失，見于尿毒癥、PK缺乏癥、輸注低鉀庫血、胃癌、胃潰瘍出血等.（3）裂細(xì)胞（Schlzocy...
查看更多2019-819
1．RBC的Hb、網(wǎng)織RBC、MCV、MCH、MCHC及RBC體積分布寬度（RDW）是判定貧血類型重要依據(jù)：(1)Hb/RBC比值：正常人：Hb/RBC比值為3gHb/L=100萬RBC/μL即3:1。AA、溶血性貧血及繼發(fā)性貧血等屬此類。3:1者即為大細(xì)胞高色素性貧血,(2)網(wǎng)織RBC是新生的RBC，可反映造血機(jī)能的好壞。正常情況下為0.5~1.0%,代償性反應(yīng)者多5%。其網(wǎng)織RBC內(nèi)嗜堿性網(wǎng)織增多，代償性功能減低者，低于正常水平。多見于AA，但有不典型AA（1/4）患者可...
查看更多2019-815
三、無血清培養(yǎng)基1979年神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)了一個(gè)重要進(jìn)展，用化學(xué)添加劑即可維持神經(jīng)細(xì)胞存活與生長而不需要在培養(yǎng)基中添加血清。其工作基礎(chǔ)是用合適的激素、營養(yǎng)物和促貼壁的物質(zhì)的組合置換培養(yǎng)基中的成分，后找到了適合大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)的試劑配方，該配方稱為N2，專門用于神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)，早是用在B104大鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系的培養(yǎng)。它的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是1：1的DMEM與H12的混合液，添加了胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、腐胺和硒。胰島素和胰島素樣生長因子對(duì)于大多數(shù)類型細(xì)胞的存活和生長有重要作用，硒是谷胱甘肽...
查看更多2019-815
一、基礎(chǔ)培養(yǎng)基絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液(BSS)基礎(chǔ)上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`sMEM的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`sF12也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)含有無機(jī)鹽和代謝添加劑（例如核苷酸）。MEM/F12這兩種培養(yǎng)基各取1/2，形成神經(jīng)生物學(xué)通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM，現(xiàn)應(yīng)用于快速生長的細(xì)胞，同MEM含有相同的營養(yǎng)成分，但濃度高...
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