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技術文章
2019-814
早期建立iPS細胞的方法為：利用逆轉錄病毒介導表達4個Yamanaka因子,然后將細胞在ES細胞培養(yǎng)液中培養(yǎng),再用抗性基因篩選多潛能性相關啟動子的激活，如Oct4和Nanog啟動子，在得到細胞形態(tài)相似的iPS細胞后，鑒定iPS細胞的多潛能性。這些方法構建iPS細胞的效率很低,細胞多潛能性不均一,而且有內(nèi)在安全問題,如病毒的插入突變c-Myc的致癌性,使其仍無法應用于臨床治療。為解決這些安全問題和提高iPS細胞建系的效率,人們從多方面改進構建iPS細胞。1.轉座子技術英國和加拿...
查看更多2019-814
污染是細胞培養(yǎng)技術中面臨的主要問題，某些污染的發(fā)生往往難以察覺及檢測，而且污染源能長期共存于培養(yǎng)體系中。常見污染情況有：1.細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力是否足夠，尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象?？稍谂囵B(yǎng)液中加相應的抗生素處理2.霉菌：培養(yǎng)液是...
查看更多2019-813
儲存溫度生物樣本的長期儲存通常使用盡可能低的溫度來降低樣本內(nèi)的生化反應提高樣本內(nèi)各種成分的穩(wěn)定性。生物大分子、細胞、組織和器官的常用儲存溫度有-80℃(超低溫冰箱),-140℃(液氮氣相或深冷冰箱)以及-196℃(液氮液相)，溫度越低樣本的穩(wěn)定保存時間越長。0～-60℃是水的結晶溫度，容易對細胞和組織的微觀結構造成傷害，一般不使用這一溫度來保存組織和細胞。部分經(jīng)過提純的生物大分子可以在0～-60℃穩(wěn)定保存一定時間，但在組織樣本內(nèi)生物大分子受到細胞組織內(nèi)多種因素的影響，穩(wěn)定性有...
查看更多2019-85
在細胞培養(yǎng)中常可見到細胞及培養(yǎng)液中有一些大小不等、形態(tài)不同的黑色顆粒在運動。如果鏡下檢查(100x)每視野計數(shù)在10個以上者就可能使細胞生長受到影響，如果其數(shù)量再增多細胞可停止增殖繼而死亡。人們常稱這種顆粒為黑膠蟲或中毒顆粒。?關于黑膠蟲的描述ü分類上的描述對于黑膠蟲的分類，學術界沒有明確給予說法。關于黑膠蟲的分類，目前大部分人認為黑膠蟲污染是微生物感染。在一些文章論述上把黑膠蟲歸為生物污染類型，但是沒把它歸為確定的生物分類類型，只是把黑膠蟲獨立為一種未知生物。而根據(jù)中國病毒...
查看更多2019-85
衰老（AgingorSenesence）這個詞意味著隨著年齡增加，機體逐漸出現(xiàn)的退行性變化。衰老的普遍性、內(nèi)因性、進行性及有害性作為衰老的標準被普遍接受。自19世紀末應用實驗方法研究衰老以來，先后提出的學說不下20余種，很多學說并沒有得到實驗研究的支持。目前的研究認為，衰老由干細胞衰退、DNA退化、飲食精神因素、衰老基因活躍等是綜合因素的結果，仍未形成統(tǒng)一的衰老理論。衰老可以看作是身體機能的逐漸衰退，它與人類?；嫉拇蠖鄶?shù)慢性疾病有關，比如癌癥、糖尿病和癡呆。大家都希望在自己的...
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