TC-1小鼠肺上皮細胞

細胞別名：TC-1細胞；小鼠肺上皮細胞 小鼠肺上皮細胞；TC-1細胞

生物安全水平：1

培養(yǎng)基&血清：見培養(yǎng)條件

生物體：小家鼠（小鼠）

來源：器官：肺

細胞接收后的操作流程與注意事項：

1、如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂、漏液等情況，請及時做好照片記錄并聯(lián)系我們。

2、擰松瓶蓋，細胞瓶豎立培養(yǎng)8h（或到第二天）

3、待細胞沉底后吸除上層液體（含碎片殘渣，請小心操作），然后吸取沉底的細胞層（2ml左右）轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶。

4、加入新鮮的*培養(yǎng)基（如細胞狀態(tài)較差可將血清濃度調(diào)高到15%）繼續(xù)培養(yǎng)。

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴(yán)格遵照無菌操作）

1、將培養(yǎng)瓶/皿中的細胞重懸混勻。

2、吸取2/3或者一半混勻后的細胞懸液到新的培養(yǎng)瓶/皿。

3、分別在原瓶/皿和新分瓶的培養(yǎng)瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養(yǎng)基，使細胞密度保持5×10（5）/ml左右。

4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況和細胞密度，定期半量換液（每周2-3次），待細胞密度大于2×10（6）/ml以后重復(fù)1項操作或者凍存。

相關(guān)細胞資料：

培養(yǎng)條件：GIBCO(1640+10%胎牛血清)

培養(yǎng)環(huán)境：95%空氣；5%二氧化碳（CO2）

溫度：37.0℃

保存：凍存血清：95%*培養(yǎng)基；5%二甲基亞砜（DMSO）

儲存溫度：液氮

實驗要點及說明 
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)*的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

TC-1小鼠肺上皮細胞

細胞處理方法：

一、貼壁細胞
1、 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4、37度平衡1-2小時。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基，到50ml離心管中，剩下細胞密度達到80%至90%可以傳代，如沒有達到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6、如果肉眼檢查上清有細胞，對50ml上清進行離心收集細胞，如果細胞連片狀態(tài)，棄掉上清對收集的細胞進行胰酶消化（1ml胰酶37度），接種培養(yǎng)。

二、懸浮細胞
1、接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4、細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5、1000rpm，5min 離心，用吸管小心吸出上清，加入培養(yǎng)基，重懸細胞。
6、將重懸好的細胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細胞培養(yǎng)瓶種，加入新鮮培養(yǎng)基，置于 37℃，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細胞）。